O MasterMix RD-OneStep Mix RT-qPCR com ROX (2x) contém transcriptase reversa e GoldTaq Pol Hot Start em tampão de RT-qPCR otimizado com MgCl2+ e dNTPs. O kit é composto por todos os reagentes necessários para RT-qPCR (exceto amostra e primer/sondas) em uma solução pré-misturada (2x) pronta para uso. A mistura de enzimas é baseada em uma transcriptase reversa geneticamente modificada com estabilidade térmica aprimorada, proporcionando maior especificidade, alto rendimento de cDNA e eficiência aprimorada para fragmentos de cDNA altamente estruturados e longos. O mastermix também contém inibidor de RNase que é essencial ao trabalhar com baixas quantidades de RNA inicial.

Deve ser utilizado em uma concentração final de 1x com adição de RNA molde e primers/sondas no volume total da reação. A atividade da polimerase é inativada quimicamente à temperatura ambiente e ativada automaticamente no início da desnaturação inicial. A ativação térmica previne a extensão de primers de forma não específica e a formação de dímero de primer em baixas temperaturas durante a ciclagem da RT-qPCR. 

Concentração:

MasterMix One Step 2x concentrado.

Transporte:

Transportado em gelo reciclável (2 a 8°C).

Condições de Armazenamento:

Armazenar a -20°C (evitar ciclos de congelamento e descongelamento; armazenar no escuro). Quando em uso frequente, o RD-OneStep Mix RT-qPCR com ROX deve ser aliquotado.

Estabilidade:

RD-OneStep Mix RT-qPCR com ROX é estável por 4 semanas a 4°C e 12 meses a -20°C.

Sensibilidade

Os alvos geralmente podem ser detectados em concentrações de <1 pg a 20 ng de RNA poli(A) (mRNA) ou 10 pg a 1 μg de RNA total. Quantidades ainda menores de RNA podem ser amplificadas com sucesso ao usar transcritos altamente expressos.

Conteúdo do Kit꞉

Master mix de RNA polymerase termoestável (HotStart), dATP, dCTP, dGTP, dTTP, KCl, 2,5mM MgCl2+, tampão de reação e aditivos estabilizadores.

Aplicação:

Deve ser aplicado apenas a pesquisa cientifica.